蛇口腔炎病原菌的分离与鉴定

小村牧民

                                                                                                                蛇口腔炎病原菌的分离与鉴定

      1、材料与方法

      发病情况动物园于1999年12月3日引进一批蛇，到2000年3月21日开始出现死亡，经检查发现发病率高达100%，主要症状为蛇口腔粘膜溃烂坏死，有脓性分泌物，肺充血，肝有出血点，胃粘膜弥漫性出血坏死且部分粘膜脱落。死亡率高达50%以上。

      病原的分离培养及形态观察无菌条件下采取患病的水律蛇、广蛇口腔脓性分泌物和刚死的眼镜蛇、榕蛇的口腔脓性分泌物及肝、肺的病料，划线于普通琼脂平板、兔血平板和S-S琼脂平板上进行细菌的分离培养，并置于35℃恒温箱培养24h，观察菌落的生长情况。取优势菌落移接到普通琼脂平板作纯培养后供以下试验用，并对纯培养物作革兰氏染色，镜检，观察细菌的形态结构特征和纯度。同时取病料抹片，革兰氏染色，镜检。

       致病性试验将各细菌纯培养物分别接种于普通营养肉汤，35℃培养18h，取各培养物012mL分别腹腔接种小白鼠，每个菌株接种3只小白鼠，对照组腹腔注射012mL无菌肉汤，观察2d，对死亡或有明显症状的小白鼠进行解剖，取病料进行涂片镜检，以确认是否为接种菌。

       生化鉴定将致病菌的纯培养物经扩大培养后做以下生化试验:各种糖(醇、苷)发酵试验、尿素酶、氧化酶、苯丙氨酸脱氢酶、硝酸盐还原、硫化氢产生、V—P试验、半固体动力试验、甲基红试验等。

      致病菌的药物敏感性试验及治疗取经鉴定的致病菌涂布接种于普通营养琼脂平板上，用纸片法进行药物敏感性试验(药敏纸片为上海市医学化验所产品)，以抑菌圈直径的大小为敏感性指标，判断标准为:抑菌圈的直径大于30mm为高度敏感，20～30mm为中度敏感，10～20mm为低度敏感，小于10mm为耐药。根据药物敏感性结果，采取综合防治措施。